Mokslininkai iš „Colossal Biosciences“ – biotechnologijų apsaugos bendrovės, geriausiai žinomos dėl bandymų sugrąžinti gauruotuosius mamutus – teigia, kad jiems pavyko sėkmingai išauginti tris didžiųjų vilkų jauniklius. Tai pavyko padaryti rekonstravus vilko genomą iš senovinės DNR ir nustačius genų versijas, kurios būdingos tik didiesiems vilkams – bet ne išnykusių plėšrūnų giminaičiams.
Tada komanda pakoregavo šiuolaikinių pilkųjų vilkų (Canis lupus) DNR, kad būtų įtraukti šie unikalūs genų variantai. Jie įterpė DNR į pilkųjų vilkų kiaušialąstes ir leido joms subręsti laboratorijoje, o paskui įleido į surogatinių vilkų patelių įsčias, pranešė „Time“. Trys embrionai buvo sėkmingai implantuoti trims surogatinėms vilkų kalėms, todėl gimė sniego baltumo vilkiukai, pavadinti Romulu, Remu ir Khaleesi – kurie Johno Snow didįjį vilką Vaiduoklį HBO televizijos seriale „Game of Thrones“.
„Mūsų komanda paėmė DNR iš 13 000 metų senumo danties bei 72 000 metų senumo kaukolės ir sukūrė sveikus didžiųjų vilkų jauniklius, – pareiškime sakė „Colossal“ generalinis direktorius Benas Lammas. – Kažkada buvo pasakyta, kad bet kuri pakankamai pažangi technologija neatskiriama nuo magijos. Šiandien mūsų komanda turi galimybę atskleisti dalį magijos, prie kurios dirba.“
Norėdama „sugrąžinti“ didįjį vilką, mokslininkų komanda taikė procesą, panašų į tą, kuriuo 1996 m. buvo sukurta avelė Dolly.
Norint šiuo metodu sukurti tobulą kloną, iš klonuojamo objekto pašalinama viena ląstelė ir išskiriama jos genetinė medžiaga, esanti ląstelės branduolyje. Tada ši genetinė informacija įterpiama į tos pačios rūšies gyvūno donoro, kurio branduolys buvo pašalintas, kiaušinėlį. Kiaušinėlyje dabar yra visa genetinė informacija, reikalinga pradiniam klonavimo objektui atkurti – ir jis perduodamas surogatinei motinai, kad ši išnešiotų vaisių.
Tačiau, kadangi didieji vilkai išnyko paskutiniojo ledynmečio pabaigoje, „Colossal“ turėjo apytiksliai sukurti savo didžiųjų vilkų ląsteles, surinkę nuorodas iš fosilijų.
Norėdami atkurti gyvūno genomą, jie naudojo genetinius mėginius iš didžiųjų vilkų fosilijų ir palygino juos su jų gyvų giminaičių, įskaitant vilkus, šakalus ir lapes, genomais. Kiaušinėlių donorais jie pasirinko pilkuosius vilkus – nes šie gyvūnai yra artimiausi gyvi didžiųjų vilkų pusbroliai.
Atlikę genominę analizę mokslininkai nustatė 20 esminių 14 genų skirtumų, kurie lėmė išskirtines didžiųjų vilkų savybes, įskaitant didesnį dydį, baltą kailį, didesnius dantis ir būdingą staugimą.
Tada jie surinko ląsteles iš gyvų pilkųjų vilkų kraujo mėginių – tai mažiau invazinis metodas nei darbas su audinių fragmentais, kaip buvo padaryta su avimi Dolly. Tada, naudodami CRISPR genų redagavimo technologiją, komanda atliko 20 redagavimų 14 nustatytų genų, kad jų seka būtų tokia pati kaip senųjų vilkų giminaičių.
Sukūrus šias „didžiųjų vilkų ląsteles“, jų branduoliai buvo išskirti ir įterpti į gyvo pilkojo vilko kiaušinėlius. Kaip ir avies Dolly atveju, iš šių donorinių kiaušialąsčių buvo pašalinti jų branduoliai, kad būtų galima įterpti naują DNR. Lytinės ląstelės – pavyzdžiui, kiaušinėliai ir spermatozoidai – paprastai turi tik po vieną kiekvienos chromosomos kopiją, tačiau kūno ląstelės turi dvi kopijas. Taigi, perkėlus kūno ląstelės branduolį į reprodukcinę ląstelę, jai suteikiami visi genetiniai nurodymai, reikalingi subręsti į embrioną.
Laboratorijoje kiaušialąstėms buvo leista subręsti į embrionus, ir taip buvo gauti 45 embrionai, perkelti į dviejų naminių šunų, kurie techniškai yra pilkojo vilko porūšis, įsčias.
Kiekvienoje surogatinėje motinoje įsitvirtino tik po vieną embrioną. Po 65 nėštumo dienų, 2024 m. spalio 1 d., per cezario pjūvį gimė Romulas ir Remas. Po kelių mėnesių visas procesas buvo pakartotas dar kartą su trečiu surogatiniu šunimi, kuris po trijų mėnesių „pagimdė“ Khaleesi.
„Colossal“ pasidalijo filmuota medžiaga, kurioje užfiksuota, kaip Romulas ir Remas žengia pirmuosius žingsnius, mokosi staugti ir iš naujagimių virsta jaunikliais. Jie apibūdino didžiuosius vilkus kaip „pirmąjį pasaulyje atkūrimą“.
Tačiau egzistuoja ir dar vienas atkūrimas: 2003 m. Ispanijos mokslininkai klonavo išnykusią laukinių ožkų rūšį, vadinamą bucardo, arba Pirėnų ibeksą (Capra pyrenaica pyrenaica). Tiesa, 2009 m. atlikto tyrimo duomenimis, naujagimis ožiukas nugaišo praėjus vos kelioms minutėms po gimimo.
Bendrovė „Colossal“ taip pat paskelbė, kad gimė dvi klonuotų raudonųjų vilkų – labiausiai nykstančių vilkų pasaulyje – vados, sakoma bendrovės pranešime.
Šis pranešimas pasirodė praėjus vos keliems mėnesiams po to, kai „Colossal“ pristatė genetiškai modifikuotas „garuotąsias peles“, kurių kailis panašus į storą gauruotųjų mamutų kailį – ir tapo svarbiu bendrovės projekto, kuriuo siekiama iki 2028 m. sugrąžinti šiuos ledynmečio titanus, etapu, rašo „Live Science“.